免疫组化主要用在病理标本上，病理标本制作非常复杂。首先用福尔马林即甲醛进行固定。固定过程会导致福尔马林蛋白和病理标本上原有的抗原进行交联，交联过程会导致抗原发生封闭。另外，后期病理标本的制作过程中，会用到非常多的试剂，比如酒精、二甲苯等。试剂也会造成病理组织本身抗原发生封闭。还有加热过程，也会导致抗原发生封闭。抗原封闭会造成的后果，是使抗原不能非常好的暴露出来，即不能显露出来，最终会导致免疫组化的结果不能够正常表现出阳性，即原来应该阳性的部分由于抗原封闭之后不能造成明显阳性表达，所以会影响免疫组化结果的判断。 全世界都通用叫做抗原封闭修复的方法来解决这个问题。目前最主要的方法主要是两种，一种是化学试剂方法，即用EDTA或者EGTA的方法，都可以使抗原很好被显露出来，从而让免疫组化阳性结果很好的表达出来。另外一种可以用高压加热修复，能使免疫组化的抗原很好的显露出来，从而达到理想的免疫组化结果。