一种测定癌细胞迁移能力的便捷方法

　　目的和方法：用聚四氟乙稀制作内径1.4 c的小圆筒，以一片聚碳酸酯核孔膜(孔径8μm，中国科学院上海原子核研究所提供)和一片醋酸纤维酯微孔滤膜(孔径5μm，上海医药工业研究院提供)将小圆筒分隔成上下二个小室，上室高1.8 cm，下室高0.3 cm，二室间以螺丝固定。将1 mL 1640培养液培养的人胃腺癌细胞(SGC-7910)或B16黑色素瘤细胞(二细胞株均由中国科学院上海药物研究所提供)置于上室，下室加同样的培养液，保持上下二室的培养液液面相平。CO2培养箱37℃培养。培养结束后取出微孔滤膜，用70%乙醇固定，H.E染色。将滤膜等分为四个象限，用光学显微镜随机计数每个象限中二个视野内穿过核孔膜并粘附在微孔滤膜上的癌细胞数。结果：如此处理的二类癌细胞都有能力迁移通过核孔膜均匀地粘附在微孔滤膜上。计数观察清晰容易。并且随着癌细胞孵育时间(5～30 h)的延长，迁移到膜上的细胞数也增加。随着所用细胞浓度(5×104～4.5×105细胞数/mL)的增加，迁移到微孔滤膜上的细胞数也增加。将药物(阿霉素，甲2巨球蛋白-广谱蛋白酶抑制剂)置于上室与癌细胞同孵育，可以观察到药物的不同浓度和不同的持续作用时间，能够明显地影响癌细胞的迁移能力。结论：采用此种微孔滤膜腔法测定癌细胞的迁移能力，较之以往使用的琼脂糖移植法和毛细血管法方法更简便，加入的癌细胞体积可达1 mL，并且用化学蚀刻扩孔制成的核孔膜，微孔呈直筒状，孔径一致，膜耐高温，化学稳定性极好。这些均为实验结果的准确性提供了保障。癌细胞的迁移能力与其转移特性密切有关。这一方法的建立，将为在离体条件下观察癌细胞转移特性及药物对癌细胞转移能力的影响提供了可行的手段。