血管平滑肌细胞增殖与迁移的机制研究
目的:血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖与迁移在动脉粥样硬化(AS)的早期、中期或AS进展期或血管事件的发病机制中起着关键性作用。方法:采用改良的Boyden小室法检测VSMCs的迁移效应;以MTT法、[3H]-Tdr掺入法、[3H]-脯氨酸标记法和VSMCs计数评价VSMCs的增殖效应;将培养的VSMCs分为5组;2%胎牛血清(2%FCS)组、AngⅡ组(其浓度为10-10~10-6mol/L)、 Losartan组(其浓度为10-7~10-5 mol/L)、 MCP-1 mcAb组(终浓度为10 μg/mL)和阳性对照组(含5%的酵母多糖活化血清)。结果:(1)对照组也有少量的VSMCs移动,提示胎牛血清中有生理量的VSMCs的趋化物质或生长因子;在AngⅡ组中,VSMCs的迁移数量随着Ang Ⅱ浓度由10-10~10-6mol/L的增加而明显的增加(P<0.01);Losartan或MCP-1 mcAb均能显著地抑制Ang Ⅱ介导的VSMCs的迁移效应(P<0.001)。(2)Ang Ⅱ促进VSMCs对MTT的摄取与代谢、VSMCs内DNA和蛋白质合成量;Losartan或MCP-1 mcAb均能抑制VSMCs内细胞代谢、DNA和蛋白质合成量;Ang Ⅱ、MCP-1 mcAb、 Losartan对VSMCs的计数均无明显影响(P>0.05)。结论:(1)Ang Ⅱ和MCP-1系VSMCs迁移与增殖的主要因子,其机制均通过AT1所介导,AngⅡ在10-12 mol/L浓度时无上述效应,在10-10~10-6mol/L浓度范围内上述生物效应随浓度增加而增强,提示组织局部的RAS中AngⅡ浓度仅在超生理浓度情况下,才发生病理性反应。(2)AngⅡ受体1(AT1)拮抗剂Losartan或单核细胞趋化蛋白-1抗体(MCP-1 mcAb)均能有效地抑制VSMCs迁移与增殖效应,一方面为Losartan或MCP-1 mcAb防治AS提供一定的理论依据;另一方面提示AngⅡ或MCP-1虽然是VSMCs迁移与增殖的主要因子,但并非唯一的因子,从而提示VSMCs迁移与增殖效应系多因子的综合作用。
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