三种组织内源性生长因子含量变化与创面修复的关系

www.cnkang.com 2007-3-24 8:19:00 中华康网

　　【摘要】　目的　研究内源性生长因子含量变化对创伤修复结局的影响。方法　用放射免疫和改进的Cortas法测定34例瘢痕和肉芽创面组织匀浆中EGF、TNF和NO含量变化，并探讨这三种因子含量变化与组织修复效果的关系。结果　以上三种因子含量在瘢痕组织显著高于溃疡创面肉芽组织，其中以男性或青少年以及伤后1～2年患者的标本更为明显。结论　创面内源性生长因子含量不足或过多分别是溃疡形成与瘢痕生长的原因之一。

The changes in endogenous growth factors and their relation with wound healing

FU Xiaobing, WANG Yaping, SUN Tongzhu, et al.

　　304th Hospital of People's Liberation Army,Beijing 100037

　　【Abstract】　Objective　To explore the effects of endogenous gr owth factors on the formation of scars and ulcers after trauma or burn.M ethods　The amounts of endogenous epidermal growth factor (EGF),tumor ne c rosis factor(TNF) and nitric oxide (NO) in scar and the developing granulation t issues after trauma or burn were determined and their relation with the wound he aling were studied.Results　The results showed that EGF,TNF and NO could be found in all scars and the granulation tissues,but their concentrati on varied with different tissues,sex and age of patients.In male patients or you ngers,the amounts of EGF,TNF and NO in scars were much greater than those in g r anulation tissues.Conclusions　The results indicated that the gr owth factors are necessary for wound healing, but insufficiency or overp roduction of the endogenous growth factors may lead to the development of chronic ulcers or scar formation after trauma or burn.

　　【Key words】　Burn Epidermal growth factor Tumor necrosis factor Nitric oxide

　　生长因子对组织修复和创伤愈合作用的研究已日益受到人们的重视，并有较多文献报道［1，2］。研究发现，在某些创面(如慢性溃疡)，组织内源性生长因子含量的变化对创面修复质量及其预后有着重要的影响［3］。我们对34例创伤和烧伤病人肉芽创面和瘢痕组织中内源性表皮细胞生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子(TNF)和一氧化氮(NO)含量的变化进行了观察，并就这三种因子的变化与不同创面修复结局之间的关系进行了讨论。

　　1　材料与方法

　　1.1　标本来源　34份标本均来源于本院住院病人，其中创伤5例，烧伤29例，男性20例，女性14例，平均年龄24.3岁。34份标本中瘢痕18份，肉芽组织16份。所有标本均于患者手术时采取，于无菌条件下-20℃保存。与此同时，根据病历记录患者创面(瘢痕或溃疡)的致伤原因、部位、时间以及治疗方法等。

　　1.2　生长因子含量测定　将所有标本称重后用0.01mol/L pBS(pH7.4)作为介质进行匀浆，然后在4℃，3000 r/min条件下离心15min。取上清液按放免法测定组织匀浆中表皮细胞生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子(TNF)含量和用改进的Cortas法［4］测定一氧化氮(NO-2)含量。用考马氏亮兰法定蛋白。最后以标准品吸光度A值按线性回归计算每一样品中EGF、TNF以及NO含量，结果分别以pg/mg蛋白和mmol/mg蛋白表示。

　　1.3　数据分析　用SDAS软件对所有数据进行统计学处理，结果以x±s表示。

　　2　结果

　　2.1　一般结果　所有瘢痕组织中的EGF、TNF以及NO含量显著高于肉芽组织(表1)。

表1　瘢痕与肉芽组织中EGF、TNF以及NO含量

　　Tab1 Changes of EGF,TNF and NO in scar and

　　granulation tissues

组　别标本数 EGF

　　(pg/mg蛋白)
TNF

　　(pg/mg蛋白)
NO

　　(mmol/mg蛋白)

瘢痕组织 18 12.0±3.7 84.3±42.9 1.4±0.6
肉芽组织 16 5.5±1.9* 24.8±14.2* 0.4±0.3*

与瘢痕组相比：*P＜0.05

　　2.2　患者性别、年龄以及病程长短与EGF、TNF和NO含量变化的关系　瘢痕组织中三种因子含量变化趋势与患者性别、年龄以及病程有一定关系(表2～5)。

表2　不同性别患者瘢痕与肉芽组织中三种因子含量变化

　　Tab2 Changes of growth factor amount in scar and granulation

　　tissues in patients with different sex

性

　　别
标

　　本

　　数
瘢痕组织标

　　本

　　数
肉芽组织
EGF TNF NO EGF TNF NO
男 11 14.0±5.0 114.3±44.3 1.6±0.5 9 6 .0±2.2 23.7±14.4 0.3±0.2
女 7 10.7±5.1* 56.9±19.4* 1.3±0.6 7 6.1±2. 5 20.8±6.1 0.4±0.2

与男性相比：*P＜0.05

表3　不同年龄段患者瘢痕与肉芽创面三种因子含量变化

　　Tab3 Changes of growth factor amounts in scar and granulation

　　tissues in patients with different age

年龄（岁）标

　　本

　　数
瘢痕组织标

　　本

　　数
肉芽组织
EGF TNF NO EGF TNF NO
＜20 7 15.2±13.0 91.2±56.3 1.4±0.6 7 5.4 ±1.6 21.4±7.9 0.4±0.2
＞20 11 11.8±4.1* 82.0±40.1* 1.4±0.7 9 5.6±2 .3 27.8±18.2* 0.4±0.2

与小于20岁年龄组相比：*P＜0.05

表4　不同病程患者瘢痕组织中三种因子含量变化

　　Tab4 Changes of growth factors in scars in patients

　　with different time

时间(年) 标本数 EGF TNF NO
＜1 8 15.9±12.7 81.5±49.8* 1.3±0.5
1～2 5 16.4±7.1 120.1±53.5 1.5±0.8
＞2 5 13.0±7.5* 68.5±35.9* 1.9±1.2

与病程为1～2年组相比：*P＜0.05

表5　不同病程患者肉芽组织中三种因子含量变化

　　Tab5 Changes of growth factors in granulation tis sues

　　in patients with different time

时间(天)
时间(天) 标本数 EGF TNF NO
＜40 7 5.4±2.1 28.0±15.5 0.6±0.4
40～50 4 4.4±0.6 15.4±1.6 0.2±0.1
＞50 5 6.2±1.9 25.9±16.2 0.3±0.1

　　3　讨论

　　有关创伤修复(愈合)过程中创面渗液中生长因子含量变化的研究已有报告，但直接从临床标本研究修复组织本身内源性生长因子含量变化以及与修复结局关系的报道却较少［5，6］。我们的初步结果表明，不同的修复结局其创面组织中内源性生长因子含量存在显著差别，总的趋势是瘢痕组织中EGF、TNF以及NO含量均明显高于肉芽组织。进一步分析我们还观察到，以上三种因子在瘢痕组织中的变化与患者性别、年龄以及病程长短均存在一定的关系，即男性与青少年患者的瘢痕组织中三种因子含量高于对照，其中以病程为1～2年患者的瘢痕组织最为明显。这一结果表明，过量的EGF等生长因子在瘢痕早期发生中起重要作用。由于本研究中所有患者致伤原因均为创伤和烧烫伤，故从有限的标本中尚没有观察到伤因差别对三种因子含量的影响。

　　有关EGF和TNF对创伤修复的促进作用已得到众多研究证实［7，8］，而NO与组织修复的关系却较少报告。一般来讲，创面修复组织中一定量的内源性EGF与TNF对促进创面炎症反应与再上皮化过程均有积极作用，但过量生长因子在局部创面存在对组织修复的影响尚不明确。我们以前的研究表明，从量效关系来讲，只有创面保持一定量的生长因子才对修复有促进作用［3］。当修复局部生长因子含量不足时，组织修复细胞有可能因缺少因子刺激而导致创面修复困难，最终形成难愈合溃疡或残余创面。而当某些因子过量时，这些因子有可能在局部微环境影响下，对组织修复细胞产生长期持续刺激作用，进而导致修复过度发生。本研究中瘢痕组织EGF、TNF含量显著高于溃疡组织的事实以及与创面修复的关系进一步证实了我们以前在动物实验中有关因子含量影响修复结局的论断［3，6］，其结果为从生长因子角度控制瘢痕生长和溃疡发生提供了理论依据。至于NO在瘢痕组织中含量的增加可能与它作为一种双向调节因子，在一定浓度条件下起血管舒张作用，参与瘢痕形成早期的血供，以及与瘢痕发红和发痒等临床表现有关。本课题受国家杰出青年科学基金资助(编号：39525024)参考文献

　　1　Falanga V.Growth factors and wound healing.Dermatol clin,1993,11:667 -672.

　　2　Kingsnorth AN,Slvin J.Peptide growth factor and wound healing.Br J surg,1991, 78:1286-1292.

　　3　付小兵，常国友，王亚平，等.不同修复阶段创面肉芽组织中肿瘤坏死因子含量的变化.中华实验外科杂志，1996，13：35-36.

　　4　Cortas NK,Wakid NW.Determination of inorganic nitrite in serum and urine by a kinetic cadmium-reduction method.Clin Chem,1990,36:1440-1445.

　　5　Fu XB,Pedro Cuevas,Guillermo Gimenez-Gallego, et al.Ischemia and reperfus ion reduce the endogenous basic fibroblast growth factor in rat skeletal muscles:an immunohistochemical study.Wound Rep Reg,1996,4:381-385.

　　6　付小兵编著.生长因子与创伤修复.北京：人民军医出版社，1991：2-24.

　　7　Laato M,Heino J,Kahari VM,et al.Epidermal growth factor (EGF) prevents Me thylprednisolone-induced inhibition of wound healing.J Surg res,1989,47:354-3 59.

　　8　Mooney DP,O′Reilly M,Gamelli RL,et al. Tumor necrosis factor and wound h ealing.Ann Surg,1990,211:124-133.

三种组织内源性生长因子含量变化与创面修复的关系