神经生长因子对戊四氮诱导的大鼠癫痫的同化作用

　　摘　要　目的：研究神经生长因子(NGF)在癫痫的发病和治疗中的作用。方法：大鼠侧脑室注射NGF 5 μl(1 μg/μl)，30 min后大鼠皮下注射戊四氮75 mg/kg，诱导癫痫发作，观察癫痫发作的潜伏期、发作次数、发作持续时间和死亡率。结果：癫痫的潜伏期明显缩短(P＜0.01)，发作次数明显增多(P＜0.001)；发作持续时间虽有增长，但无统计学意义。给予NGF后，大鼠死亡率明显高于对照组(P＜0.05)。结论：NGF具有提高戊四氮致癫的同化作用。提示NGF用于癫痫的治疗和预防应当慎重。

　　中图分类号　Q-33

Nerve Growth Factor Promoting Epilepsy Facilitation by Pentylenetetrazole

Zhao Xiaolin　Ni Xin　Lu Changlin

　　(Department of Neurobiology, Second Military Medical University，Shanghai 200433)

　　Abstract　Purpose：The aim is to study the effect of NGF on epilepsy by using pentylenetetrazole (PTE) induced rat model of epilepsy.Methods:NGF 5 μl(1 μg/μl) was injected into lateral ventricle of rat and minutes later PET(75 mg/kg)was injected subcutaneously to induce epilepsy.The latent period, times and duration of cerebral seizure and the death rate were observed.Results:After administration of NGF,the latent period of seizure decreased evidently(P＜0.01),the times of seizure increases evidently(P＜0.001),and the duration of seizure increasess lightly but had no statistical difference compared with control group,and the death rate of NGF group was much higher than that of control group(P＜0.05).Conclusion:NGF can promote PET-induced epilepsy.

　　Key words　Nerve growth factor, Epilepsy, Pentylenetetrazole, Facilitation

　　神经生长因子(NGF)是迄今为止发现的最有效的神经营养因子之一［1］。它除了对正常的中枢及外周神经细胞有营养因子作用外，还对损伤神经具有修复功能。癫痫的发生具有中枢神经系统改变的病理学基础［2］，这种改变会导致临床癫痫的产生，使癫痫的发生、发展成为反复。目前临床对癫痫的治疗和预防主要依靠药物、手术和中西医结合的方法。NGF用于治疗癫痫尚未见报道。为了研究NGF在癫痫的发病和治疗中的作用，本文采用戊四氮诱导的大鼠癫痫作为模型，研究了NGF对癫痫的影响。

　　1　材料和方法

　　1.1　材料

　　NGF，自制，纯度为98%；戊四氮，Serva产品。

　　江湾I-C型立体定向仪，第二军医大学仪器厂。

　　健康雄性SD大鼠，50只，体重210～250g，上海市计划生育研究所提供。

　　1.2　方法

　　大鼠用戊巴比妥(40 mg/kg)麻醉，固定在立体定向仪上，按Pellegrino鼠脑定向图谱，向侧脑室埋植微量注射套管(以前囟为零点，前囟后1.0 mm，旁开1.8 mm，深3.5 mm)，用牙科磷酸锌粉固定，肌内注射青霉素10万单位，手术后3 d开始实验。

　　动物随机分为6组，每组设对照组和实验组。对照组侧脑室注射生理盐水5 μl，实验组侧脑室注射NGF 5 μl(1 μg/μl)，30 min后各组大鼠皮下注射戊四氮75 mg/kg，观察癫痫开始发作的时间(潜伏期)，发作次数及发作持续时间；观察每组动物死亡数量，计算死亡率。

　　2　结　果

　　2.1　NGF对致癫大鼠潜伏期的影响

　　大鼠皮下注射戊四氮，7～10 min后癫痫发作，表现为点头、头部抽搐、前肢阵挛，后腿站立、跌倒，最后全身肌肉强直。根据Racine的分级法，发作为Ⅴ级，连续实验6 h。结果显示，侧脑室注射NGF后，戊四氮诱导的癫痫潜伏期明显缩短，与对照组(生理盐水组)相比有显著差异(1P＜0.01)，见图1。

　　2.2　NGF对致癫大鼠发作次数的影响

　　给予NGF后，癫痫平均发作次数，对照组为2.67次，实验组为4.14次，差异显著(2P＜0.001)，见图2。

　　2.3　NGF对致癫痫大鼠发作持续时间、死亡率的影响

　　发作持续时间略有增长，但无统计学意义。给予NGF后，癫闲大鼠死亡率，对照组为16.67%，实验组为71.42%，明显高于对照组(P＜0.05)。

　　3　讨　论

　　戊四氮是一种中枢神经兴奋剂，能够促使兴奋性突触的去极化过程增强，诱导癫痫模型。具有重复性好、易操作、指标客观等特点。研究中，我们设置了NGF对照组，在大鼠侧脑室注射NGF 5 μg和10 μg，结果大鼠均未产生癫痫症状，说明NGF本身并不能导致癫痫的产生。

　　癫痫症是基于神经原的损伤［3，4］，而导致神经功能紊乱而产生的临床常见病，传统的治疗效果良好，但治表不治本。NGF是神经系统最重要的生物活性因子之一，能诱导神经纤维定向生长，控制神经元存活数量，刺激胞体和树突的发育，促进神经元分化、发育和轴突的生长［5］，对交感神经元和副交感神经元的损伤均有保护作用［6，7］。近年来，NGF的应用性研究不断深入［8］，人们试图通过NGF特异性的生物学作用来治疗癫痫症，但个别病例显示了相反的结果。因此，进一步研究NGF对癫痫症的影响非常重要。我们的实验结果表明，NGF对戊四氮诱导的大鼠癫痫潜伏期明显缩短，发作次数增多，死亡率明显增高。提示NGF具有降低大鼠癫痫发作期阈值，提高大鼠对癫痫发作的敏感性，进一步加重癫痫症状的可能。因此，NGF具有提高戊四氮致癫的易化作用，这对于NGF用于癫痫，特别是癫痫发作时的治疗应当慎重。

参考文献

　　1，Levi-Montalcini R.The nerve growth factor thirty-five years later.Science,1987,237∶1154～1162

　　2，Scheibel ME,Crardall PH,Scheibel AB.The hippocampal-dentate complex in temporal lobe epilepsy.Epileocia, 1974,15(1)∶55～80

　　3，高旭光，崔莹，胡刚，等.海马硬化与癫痫的因果关系探讨.中华神经外科杂志，1996，294(4)∶214～216

　　4，隋鸿锦，张万琴，洪昭雄，等.海仁酸诱导癫痫模型海马的形态学改变.解剖科学进展，1997，3(2)∶103～108

　　5，Thoeren H,Barde YA.Physiology of nerve growth factor.Physiol Rev,1980,60∶1284～1335

　　6，庞清江.神经生长因子对周围神经损伤的作用.修复重建外科杂志，1991，5(4)∶237

　　7，柳川.神经生长因子与神经损伤.中华神经外科杂志，1993，9(2)∶109

　　8，毛伯墉，雷町，陈礼刚，等.脑弥散性轴索损伤的临床分析.华西医科大学学报，1996，15(4)∶422～425