聚合酶链反应为基础的差异表达基因分析技术及其在肾脏疾病研究中的应用

　　随着人类基因组计划的完成，探讨基因的功能及其在人类疾病中的作用是未来基因研究工作的重点。其中，基因表达的差异分析对阐明各种疾病的分子基础具有重要意义。自90年代以来，以聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)为基础的差异表达基因分析技术，即：差异显示逆转录PCR(differential display reverse transcription-PCR，DDRT-PCR)、cDNA代表性差异分析(representational diffcrence analysis of cDNA，cDNA-RDA)和抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridization，SSH)等在肾脏疾病研究领域中被广泛应用并已经成功地分离和克隆了一些与肾脏疾病相关的基因。结合自己的研究工作，我们主要介绍这3种技术的基本原理、主要操作方法、各自的优、缺点以及它们在肾脏疾病研究中的应用。

　　差异显示逆转录PCR(DDRT-PCR)

　　DDRT-PCR技术是1992年最先出现的一种以PCR为基础的筛选和克隆差异表达基因的方法。根据真核mRNA3＇末端含Poly(A)的原理，利用逆转录……