亚甲蓝和抑肽酶联合应用防治术后腹腔内粘连的实验观察

www.cnkang.com 2007-3-23 13:48:00 中华康网

　　【摘要】目的观察亚甲蓝与抑肽酶联合应用对术后腹腔内粘连的防治作用。方法取SD成年雌鼠开腹按Galili法制成小肠与子宫左前壁粘连模型，关腹前设4组，分别于腹腔内置入2ml生理盐水、1％亚甲蓝2ml、50000KIU抑肽酶2ml、1％亚甲蓝及50000KIU抑肽酶各2ml。以上各组均设对照组，治疗方法同试验组，但开腹后不损伤子宫角浆膜，2周后开腹观察粘连程度。结果各对照组发生粘连率均在5％以下，实验组中生理盐水组粘连发生率为95％，亚甲蓝及抑肽酶组粘连发生率分别为40％和45％；亚甲蓝加抑肽酶组粘连发生率为5％，同其他各组比较差异有显著性意义（P＜0.001）。结论腹腔内给予亚甲蓝或抑肽酶能降低腹腔内粘连发生率，两者联合用药作用更加显著。

Experimental study of the effect of methylene blue combined with aprotinin on intraperitoneal adhesion

CAO Tiansheng, LIU Ruihua,SUN Xiaoming, et al.

　　Department of General Surgery , Huadu People′ s Hospital ,Guangzhou 510800, China

　　【 Abstract】 Objective To study the effect of methylene blue combined with aprotinin on intraperitoneal adhesion.Methods Intraperitoneal adhesion models of SD rats,by scraping the anterior uterine horn wall,were divided into four groups and followed by intraperitoneal administration of saline,methylene blue,aprotinin,both methylene blue and aprotinin respectively.In addition,control rats received identical treatments but without scraping anterior uterine horn wall.Two weeks later,formation of adhesion was quantitatively graded.Results Adhesion rate was less than 5％ in control rats.In the experimental groups,95％ of the rats treated with saline,40％ of the rats with methylene blue and 45％ of the rats with aprotinin had severe adhesion whereas only 5％ of the rats by methylene blue combined with aprotinin had severe adhesion.Adhesion rate was significantly lower in the combination group(P＜0 05).Conclusions Methylene blue and aprotinin can decrease the incidence of intraperitoneal adhesion respectively.The combination of these two drugs has a more powerful effectiveness.

　　【 Key words】 Methylene blue; Aprotinin; Peritoneal cavity; Adhesion

　　腹部手术后腹腔内粘连的发生率达67％～93％，在妇科手术后则达97％，约1/3肠梗阻病例以及15％～20％的女性不孕是术后腹腔内粘连的结果[1]；因此，防止术后腹腔内粘连具有重要的意义，国内外曾采用多种方法防治术后腹腔内粘连[2]，但始终不能获得满意的效果。本实验的目的在于观察亚甲蓝、抑肽酶联合应用对术后腹腔内粘连的综合作用，以寻求一种更有效、实用、廉价、副作用少的防止术后腹腔内粘连的方法。

　　材料与方法

　　取160只SD成年雌鼠（由广州医学院实验动物中心提供），分实验及对照两大组，各80只。全部大鼠于麻醉下作一下腹正中切口约3cm，显露小肠和子宫。实验组大鼠按Galili[2]介绍的方法，用刀刮子宫前壁浆膜诱发粘连，关腹前分4组，各组均为20只大鼠：A组腹腔内注入2ml生理盐水；B组腹腔内注入1％亚甲蓝2ml；C组腹腔内注入50000KIU抑肽酶2ml；D组腹腔内同时注入1％亚甲蓝加50000KIU抑肽酶各2ml。以上各组均设对照组，每组也均为20只大鼠，腹腔内分别注入相应的生理盐水、亚甲蓝、抑肽酶、亚甲蓝加抑肽酶，但不损伤子宫角浆膜。所有大鼠关腹后自由饲食，术后两周处死动物，观察有无腹腔内粘连及其程度，按无粘连、粘连可自动分离、牵引才可分离粘连、解剖技术才可以分离粘连分别判定为粘连0、1、2、3级；0、1级为无粘连，2、3级列为明显粘连，统计粘连发生例数，结果采用χ2检验。

　　结果

　　各组粘连率见表1，各实验组比对照组发生粘连的动物数明显增多，经统计学处理差异有显著性，不因用药而发生改变。在实验各组中，生理盐水组发生的粘连率为95％，比其他各用药组显著增高（P＜0．001）；B组与C组分别为40％和45％，两组比较没有差异；D组为5％，较B组及C组明显降低（P＜0．001），说明亚甲蓝与抑肽酶联合应用较单独应用对术后腹腔内粘连的防治作用更为显著。

表1　各组动物粘连情况对比［只(%)］

组别鼠数无粘连粘连
实验A组 20 1 19(95)
对照A组 20 19 1(5)
实验B组 20 12 8(40)
对照B组 20 20 0(0)
实验组 20 11 9(45)
对照C组 20 19 1(5)
实验D组 20 19 1(5)
对照D组 20 19 1(5)

　　讨论

　　腹腔内手术是腹腔内粘连发生的主要原因，术后早期机械性肠梗阻90％以上为粘连性肠梗阻[3]。因此，对术后腹腔内粘连的防治具有十分重要的意义。我们于术后腹腔内联合应用亚甲蓝和抑肽酶，观察其对术后腹腔内粘连情况的防治作用，结果显示术后腹腔内给予亚甲蓝或抑肽酶能降低腹腔内粘连的发生率或粘连程度，而亚甲蓝和抑肽酶联合应用时作用更加显著。过去的研究认为术后腹腔内粘连形成的机制不是单一的，而是多种机制综合作用的结果。腹腔内手术、腹腔内感染及异物是腹腔内粘连的主要原因；组织炎症、纤维蛋白沉积、纤维蛋白机化、胶原蛋白形成等都可以促使粘连形成；组织损伤时，间皮细胞、内皮细胞、炎症细胞等合成，并释放纤维蛋白溶酶原激活抑制因子1和2（PAI1和PAI2）[4]，使纤维蛋白溶酶原活性降低，纤维蛋白形成增多，分解减少，也可促使粘连形成；有研究认为局部损伤、炎症等促使细胞膜产生一些自由基，如超氧化物、氢氧根等，这些自由基是多种饱和脂肪酸的氧化剂,氧自由基的产生致细胞膜损伤而诱发粘连形成[5]。

　　Kelner等[6]认为，亚甲蓝抑制粘连形成的机制，是通过竟争性抑制黄嘌呤氧化酶、硫酸亚铁离子中心的氧离子，影响嘌呤的无氧氧化作用，从而抑制超氧化物等自由基的产生；Galili等[2]进一步证实了这一机制。

　　直接将抑肽酶注入腹腔内，能有效地降低白细胞浸润，减少肉芽组织瘢痕粘连，稳定新形成的纤维蛋白而预防肠粘连发生。Ozogul等[7]研究发现抑肽酶降低粘连程度和羟脯氨酸（OHP）呈线性相关，认为抑肽酶抑制粘连形成的作用主要是在粘连形成的早期减少间皮细胞、内皮细胞、炎症细胞等合成和释放PAI1和PAI2，增强组织的局部纤维蛋白溶解活性，从而抑制粘连发生。

　　腹腔内术后粘连形成机制复杂，其中主要是各种原因致纤维蛋白溶解抑制以及氧自由基对细胞膜的损伤，抑肽酶及亚甲蓝的作用主要针对了上述多种机制，其联合应用克服了既往防治粘连方法的缺陷，疗效显著。本实验为术后腹腔内粘连的防治提供了一个效果好、费用低的防治方案，值得进一步研究。

　　基金项目：广东省科学技术委员会1998年重点科技攻关项目[粤科计字(1998)110号]

　　参考文献

　　1.Hershlag A, Diamond MP,DeCherney AH.Adhesiolysis.Clin Obstet Gynecol,1991， 34:395.

　　2.Galili Y,Ben Abraham R,Rabau M,et al.Reduction of surgery induced peritoneal adhesion by methylene blue.J Am Surg,1998,175:30-32.

　　3.Picfleman J , Lee RM.The management of patients with suspected early postoperative small bowel obstruction . Ann Surg, 1989, 210:216-219.

　　4.Whawell SA,Wang Y,Fleming KA,et al. Localization of plasminogen activator inhibitor-1 production in inflamed appendix by in situ mRNA hybridization.J Pathol,1993， 169:67-71.

　　5.Kagoma P,Burger SN,Seifter E, et al. The effect of vitamin E on experimentally induced peritoneal adhesions in mice.Arch Surg， 1985， 120:949-951.

　　6.Kelner MJ,Bagnell R,Hale B,et al. Methylene blue competes with paraquat for reduction by flavoenzymes resulting in decreased superoxide production in the presence of heme proteins. Arch Biochem Biophys， 1988， 262:422-426.

　　7.Ozogul Y,Baykal A,Onat D， et al. An experimental study of the effect of aprotinin on intestinal adhesion formation.J Am Surg， 1998， 175:137-141.

亚甲蓝和抑肽酶联合应用防治术后腹腔内粘连的实验观察