虎杖金银花联用抗Ⅱ型疱疹病毒的药效分析

　　Herpes simplex virus type-2(HSV-2)是外阴疱疹及宫颈癌等多种疾病的病因之一。阿昔洛韦(acyclovir, ACV)治疗HSV-2感染易产生耐药毒株；cidofovir肾毒性很大；HSV疫苗效果不佳。因此，研制抗病毒新药是相当重要的任务。

　　据报道，10%虎杖水煎液对HSV-1、HSV-2、甲型流感病毒京科68-1株等多种病毒有抑制作用。金银花能延缓呼吸道合胞病毒的CPE。为了获得虎杖金银花抗HSV制剂的最佳配方比，我们用空斑减数实验，以ACV为阳性对照，观察了虎杖金银花单用及联用抗HSV-2 333株的药效，并且用中效作用原理，对药效进行了分析。

　　抗病毒实验以3种方式进行：(1)病毒悬液与含药培养液37℃孵育1小时，感染细胞，这是药物对HSV-2的直接杀灭。(2)以含药培养液预先与细胞孵育2小时，再以HSV-2感染细胞，这是药物对HSV-2感染细胞的阻断。(3)先接种病毒，再以含药培养液孵育，这是对HSV-2增殖的抑制。实验设置阴性及阳性对照组，所用感染复数为1Pfu/细胞。同时，以台盼蓝拒染法作细胞毒试验。以Chou和Talalay导出的中效方程式及合用指数(Combination index, CI)方法对结果进行分析。CI＜1，表示协同；CI=1，表示相加；CI＞1，表示拮抗。

　　实验结果如下：

　　1.ACV对HSV-2 333株直接杀灭、增殖抑制、感染阻断的ED50分别为16.45 mg/L、10.85 mg/L、18.62 mg/L。虎杖与金银花以1(ED50)虎杖/2(ED50)金银花联用时，相应数值为0.25 mg/L、0.46 mg/L、3.18 mg/L，比ACV药效强。2.在3种抗病毒实验中，空斑减数率为20%～80%时，CI均＜1，说明两药联用对抗HSV-2 333株有明显的协同作用。3.ACV对HEP-2细胞的IC50为1 085 mg/L，金银花IC50为46 020 mg/L，虎杖IC50为57 850 mg/L, 金银花虎杖联用IC50为98 240 mg/L。4.从治疗指数(treatment index, TI)来考虑，TI=IC50/ED50。如果统一按直接杀灭、对增殖抑制、对感染阻断的顺序排列，ACV对HSV-2 333株的TI为66、100、58。虎杖/金银花=1 (ED50)虎杖/2(ED50)金银花时，对HSV-2 333株的TI为392 960、213 565、30 893，是ACV TI的5 954、2 135、532倍。这种联用药效比ACV强，毒性比ACV小，是最佳配方比。

　　中性作用原理已为国外医学界广泛应用，但是对中草药复方，其药物间相互作用的药效分析，尚未见用此原理分析的报道。本研究通过用中效作用原理对药效的分析，为中药组方配方提供科学的实验依据。