胃良恶性病变组织中TAG72和GRP94表达及其临床病理意义

    发布时间:2015-01-14   来源:中华康网   

   

   

  刘栋才[1],周建平,袁联文,舒国顺,任峰,周家鹏

  【摘要】 目的 研究胃良恶性病变组织中肿瘤相关糖蛋白72 (tumor-associated glycoprotein 72, TAG72)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94, GRP94)表达水平及其临床病理意义。方法 49例胃癌、20例癌旁组织、36例淋巴结转移灶和80例不同类型胃良性病例手术切除或胃镜活检标本常规制作石蜡包埋切片,TAG72和GRP94染色方法为EnVisionTM免疫组化法。 结果  胃癌TAG72和GRP94表达阳性率高于癌旁组织及各类型胃良性病变(P<0.05或P<0.01); TAG72和(或)GRP94阳性表达的癌旁组织及胃良性病变粘膜上皮均呈轻至重度不典型增生;胃癌原发灶与相应淋巴结转移灶比较TAG72和GRP94表达阳性率无明显差异(P>0.05);浸润深度T1+T2、无区域淋巴结转移及无远处器官转移病例TAG72和GRP94表达阳性率明显低于浸润深度T3+T4、区域淋巴结转移及远处器官转移病例(P<0.05或P<0.01);组织学分级II级、N1站淋巴结转移病例TAG72和GRP94表达阳性率低于组织学分级Ⅲ+Ⅳ级及N2+N3站淋巴结转移病例,但差异均无显著性(P>0.05)。结论 TAG72和GRP94表达水平在胃癌发生、进展和临床生物学行为方面可能有重要作用,TAG72和/或GRP94阳性表达的胃癌预后不良。湘雅二医院老年医学科刘栋才

  【关键词】胃肿瘤,肿瘤相关糖蛋白72,葡萄糖调节蛋白94,免疫组织化学

   

  Expression oftumor-ass0ciated glycoprotein 72(TAG72 ) and glucose-regulated protein 94 (GRP94 )and its clinicopathological significances in the benign and malignant lesions of stomach

  LIU Zhong-cai,YANG Zhu-lin1)(General Surgery of Second Xiangya Hospital of Central South University, Changsha 410011,China)

  Abstract Objective  To study on the expressive levels of TAG72 and GRP94 and detect their clinicopathological significances in the benign and malignant lesions of stomach . Methods  EnvisonTM immunohistochemistry for assaying expressive levels of TAG72 and GRP94 was used in conventional paraffin-embedded sections from specimens of gastric cancer (n=49), peritumoral tissues(n=20), metastastic foci of lymph node(n=36), and different types of benign lesions(n=80). Results  .The positive rates and scors of TAG72 and GRP94 were significantly higher in gastric cancer than those in  peritumoral tissues and different types of benign lesions (P<0.05 or P<0.01) . The positive cases of TAG72 and/or GRP94 in peritumoral tissues and different types of benign lesions showed mild- to serverely- atypical hyperplasia of epitheli.No differences were found between the expressions of TAG72 or GRP94 in primary foci and metastatic foci (P>0.05).The positive rates of TAG72 and GRP94 were significantly lower  in infiltrating depth T1+T2,no-metastasis of lymph node or distant organs than those in infiltrating depth T3+T4, metastasis of lymph mode or distant organs in gastric cancer (P<0.05 or P<0.01) .Conclusions  The expressive levels of TAG72 and/or GRP94  might have important effects on the carcinogenesis, progression and biologic behaviors of  gastric cancer , the cases of over-expression of TAG72 and/or GRP94  might have poorly prognosis .

  Key words  stomach neoplasms,  tumor-associated glycoprotein 72, glucose-regulated protin 94 , immunohistocytochemistry

   

  TAG72是一种高分子量粘蛋白类化合物,近年血清放免测定及免疫组化等方法证实TAG72血清含量及组织中表达水平与一些恶性肿瘤(如胃癌、胰腺癌及乳腺癌等)进展、生物学行为、转移或复发及预后密切相关[1-7]。GRP94是内质网分子伴侣蛋白,是细胞为了适应内质网应激状态所产生的应激蛋白。近年研究证实一些恶性肿瘤GRP94呈高表达,且与其进展、转移发生及预后密切相关[8-14];GRP94的产生对肿瘤细胞有保护作用,这极可能是某些晚期肿瘤患者对放疗和化疗不敏感的原因之人[10,11,13]。作者应用EnVision免疫组化法研究胃良恶性病变组织中TAG72和GRP94表达水平及其临床病理意义。

   

  对象与方法

  一、对象

  1.胃癌49例,男35例,女14例,年龄范围35~70岁,平均(48.5±16.8)岁;病理类型包括中分化腺癌12例,低分化腺癌26例和其他类型11例(粘液腺癌6例,印戒细胞癌4例和未分化癌1例);组织学分级包括Ⅱ级16例、Ⅲ级28例和Ⅳ级5例;癌细胞侵袭深度包括T1 2例、T2 7例、T3 35例和T4 5例;无区域淋巴结转移13例和转移36例;淋巴结转移病例包括N114例、N217例和N35例;共有11例发生远处器官转移(包括肝转移6例、肺转移2例和卵巢转移3例)。

  2.淋巴结转移灶36例,取自上述胃癌区域淋巴结转移的转移灶,男28例,女8例,年龄范围35~70岁,平均(46.4±15.2)岁,病理证实转移灶均为腺癌,病理类型均与原发灶等同,组织学分级Ⅱ级10例、Ⅲ级21例和Ⅳ级5例。

  3.癌旁组织20例,距癌组织3~5cm,取自上述癌组织旁,病理证实胃粘膜上皮正常至轻度不典型增生13例,中度至重度不典型增生者7例。

  4.浅表性胃炎10例,男5例,女5例,年龄范围35~45岁,平均(41.5±6.5)岁,病理诊断均为浅表性胃炎。

  5.慢性萎缩性胃炎15例,男9例,女6例,年龄范围38~47岁,平均(41.5±6.5)岁,病理诊断均为萎缩性胃炎,其中轻度、中度和重度萎缩性胃炎分别4例、6例和5例,5例重度萎缩性胃炎均伴有胃粘膜上皮中至重度不典型增生,6例中度萎缩性胃炎中中度和重度不典型增生各1例。

  6.胃溃疡20例,男12例,女8例,年龄范围35~55岁,平均年龄(42.8±7.4)岁,溃疡大小1~2.5cm,病理诊断均为胃溃疡,胃粘膜中至重度不典型增生8例。

  7.胃息肉20例,男13例,女7例,年龄范围37~60岁,平均(45.2±8.2)岁,息肉大小1.5~2.5cm,病理诊断腺瘤性息肉9例和单纯性息肉11例,胃粘膜中至重度不典型增生6例。

  8.胃腺瘤15例,男8例,女7例,年龄范围40~49岁,平均年龄(44.8±7.6)岁,腺瘤大小2.0~3.5cm,病理诊断均为腺瘤,其中中至重度不典型增生5例。

  二、主要试剂

  兔抗人TAG72和GRP94多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司, EnVision TM染色试剂盒购自瑞土DAKO公司。

  三、方法

  TAG72和GRP94染色方法为EnVisionTM二步法,严格按EnVisionTM染色试剂盒中操作步骤进行操作,具体染色步骤略。细胞浆和(或)细胞膜含棕黄色颗粒者为TAG72和GRP94阳性细胞, 高倍光镜下计算5个视野内VHL和HIF-1染色阳性细胞率,其均值≥25%为阳性病例,<25%为阴性病例。以多次替代对照〔用0.01mol/L PBS液(PH7.4)替代一抗〕有效的乳腺浸润性导管癌切片作为阳性对照,以0.01mol/L  PBS液(7.4)替代―抗作为每次染色的阴性对照。

  四、统计学处理

  将所得数据输入至SPSS13.0统计软件中,两样本计数资料比较行四格表 检验,多样本计数资料组内比较为行×列 检验;检验水准α=0.05。

  结果

  一、TAG72和GRP94在胃良恶性病变中表达情况

  TAG72和GRP94免疫组化反应阳性产物定位于胞浆和(或)胞膜(图1-2)。胃癌组织TAG72和GRP94表达阳性率明显地高于癌旁组织及各类型胃良性病变(P<0.05 或P<0.01);见表1。TAG72(或)GRP94阳性表达的胃良性病变和癌旁上皮粘膜上皮均呈轻至重度不典型增生。

  表1 胃良恶性病变组织中TAG72和GRP94表达情况

  病理类型

  例数

  TAG72

   

  GRP94

  阳性例数(%)

  值

  P值

   

  阳性例数(%)

  值

  P值

  浅表性胃炎

  10

  0(0.0)

  12.46

  <0.01

   

  0(0.0)

  13.33

  <0.01

  萎缩性胃炎

  15

  1(6.7)

  13.69

  <0.01

   

  2(13.4)

  11.46

  <0.01

  胃溃疡

  20

  2(10.0)

  14.99

  <0.01

   

  4(20.0)

  10.64

  <0.01

  胃息肉

  20

  3(15.0)

  12.16

  <0.01

   

  3(15.0)

  13.24

  <0.01

  胃腺瘤

  15

  3(20.0)

  7.81

  <0.01

   

  4(26.7)

  6.21

  <0.05

  癌旁组织

  20

  6(30.0)

  5.55

  <0.05

   

  6(30.0)

  6.31

  <0.05

  胃癌

  49

  30(61.2)

   

   

   

  31(63.3)

   

   

          

  与胃癌比较

  二、TAG72和GRP94表达与胃癌临床病理特征的关系

  浸润深度T1+T2、无区域淋巴结转移及无远处器官转移病例TAG72和GRP94表达阳性率明显低于浸润深度T3+T4、区域淋巴结转移及远处器官转移病例(P<0.05或P<0.01);组织学分级II级、N1站淋巴结转移病例TAG72和GRP94表达阳性率低于组织学分级Ⅲ+Ⅳ级及N2+N3站淋巴结转移病例,但差异均无显著性(P>0.05);见表2。胃癌中,30例TAG72阳性病例中GRP94表达阳性22例,两者表达呈明显一致性( =8.79,P<0.01)。

  三、胃癌原发灶和淋巴结转移灶TAG72和GRP94表达情况

  36例淋巴结转移灶中TAG72和GRP94阳性病例分别为21例和22例,其相应原发灶中TAG72和GRP94阳性病例分别为25例和26例,转移灶与原发灶比较TAG72和GRP94表达无明显差异(  TAG72 =0.96,P>0.05;  GRP94 =1.00,P>0.05)。

  表2    TAG72GRP94表达与胃癌主要临床病理特征的关系

  临床病理特征

  例数

  TAG72

   

  GRP94

  阳性例数(%)

  值

  P值

   

  阳性例数(%)

  值

  P值

  组织学分级

   

   

   

   

   

   

   

   

  Ⅱ

  16

  8(50.0)

  1.26

  >0.05

   

  8(50.0)

  1.80

  >0.05

  Ⅲ+Ⅳ

  33

  22(66.7)

   

  23(69.7)

  浸润深度

   

   

   

   

   

   

   

   

  T1+T2

  9

  2(22.2)

  7.06

  <0.01

   

  3(33.3)

  4.25

  <0.05

  T3+T­4

  40

  28(70.0)

   

  28(70.0)

  淋巴结转移

   

   

   

   

   

   

   

   

  无

  13

  5(38.5)

  3.86

  <0.05

   

  5(38.5)

  4.68

  <0.05

  有

  36

  25(69.4)

   

  26(72.2)

  淋巴结转移站

   

   

   

   

   

   

   

   

  N1

  14

  8(57.1)

  1.64

  >0.05

   

  9(64.3)

  0.72

  >0.05

  N2+N3

  22

  17(77.2)

   

  17(77.2)

  远处转移

   

   

   

   

   

   

   

   

  无

  38

  20(52.6)

  5.26

  <0.05

   

  21(55.3)

  5.38

  <0.05

  有

  11

  10(90.1)

   

  10(90.1)

   

  讨论

  TAG72是近年来从乳腺癌转移细胞株制备出的肿瘤标志物,为一种高分子粘液蛋白,除分泌腺上皮外,其它正常上皮一般不表达。TAG72除存在于乳腺癌外还广泛存在于多种不同来源的腺癌,如肺、胃肠道、胰腺和卵巢等。近年较多文献报道血清TAG72含量测定对了解乳腺癌、胃肠道癌等恶性肿瘤进展、判断淋巴结转移状况、术后监测转移或复发及评估预后等诸方面均有较重要意义。免疫组化和/或原位杂交等方法证实TAG72在一些恶性肿瘤高表达,其表达水平与这些恶性肿瘤恶性程度、转移发生及预后密切相关,高水平表达者恶性度高、进展快、易发生转移或复发及预后差[1-7]。

  GRPs是细胞为了适应内质网应激状态所产生的一类应激蛋白,与热休克蛋白有较高的同源性,GRP94是内质网内数量最多的糖蛋白,只存在于脊椎动物。近年研究证实一些恶性肿瘤GRP94呈高表达,其高水平表达的恶性肿瘤多分化差、进展快、易发生淋巴道和血道转移及预后差[8-14];此外,在一些实体恶性肿瘤研究中发现GRP94的表达有助于诱导肿瘤细胞发展和耐药性的产生,甚至诱导肿瘤细胞的免疫耐受,从而对肿瘤细胞有保护作用,这可能是恶性肿瘤细胞对化疗药物耐受和放疗抵抗的重要机制之一,检测GRP94表达水平对指导临床治疗可能有重要临床应用价值[10,11,13]。

  本组资料显示,胃癌TAG72和GRP94表达阳性率及其评分明显高于胃癌旁组织及其良性病变(P<0.05或P<0.01); TAG72和(或)GRP94阳性表达的癌旁组织及胃良性病变粘膜上皮均呈轻至重度不典型增生;胃癌原发灶与相应淋巴结转移灶比较TAG72和GRP94表达阳性率无明显差异(P>0.05);浸润深度T1+T2、无区域淋巴结转移及无远处器官转移病例TAG72和GRP94表达阳性率明显低于浸润深度T3+T4、区域淋巴结转移及远处器官转移病例(P<0.05或P<0.01);组织学分级II级、N1站淋巴结转移病例TAG72和GRP94表达阳性率低于组织学分级Ⅲ+Ⅳ级及N2+N3站淋巴结转移病例,但差异均无显著性(P>0.05);提示 TAG72和GRP94表达水平在胃癌发生、进展、临床生物学行为方面可能有重要作用,TAG72和/或GRP94阳性表达的胃癌预后不良。

   

  参考文献

  [1] Filella X,FrieseS, RothHJ,et al.Technical performance of the Elecys CA72-4 test- development and field study[J] . Anticancer Res,2000,20(6D):5229-5232

  [2] Muxi A, Pons F, Vidal-Sicurt S,et al. Radoimmunoguided surgery of colorectal carcinoma with an III in-labelled anti-TAG72 monoclonal antibody[J] . Nucl Med Commun,1999,20(2):123-130

  [3] Xiang J, Moyana T, Matte G,et al. Establishment of a rat colonic carcinoma model for study of immunoreagents against the human tumor-associated TAG72 antigen[J]. Cancer Biother Radiopharm,1996,11(5):335-344

  [4] Percivale P, Bertoglio S , Meszaros P , et al. Radioimmunoguided surgery after primary treatment of locally advanced breast cancer . J Clin Oncol,1996,14(5):1599-1603.

  [5] Konishi F , Matzunou H , Konishi K , et al. Histological localization of TAG72 in gastric cancer and a clinico-pathological study of the CA72-4 serum values[J]. Gan No Rinsho,1990,36(^):691-699

  [6] Werther JL, MadMurruy R , Bruckner H , et al. Mucin-associated sialosyl-tn antigen expression in gastric cancer correlates with an adverse outcome[J] . Br J Cancer , 1994,69(3):613-616

  [7] 徐宏勇, 徐立, 高建宏, 等. 肿瘤相关糖蛋白-72抗原在原发性胆囊癌中表达及其临床意义[J]. 山东医药,2007,47(3):16-20

  [8] Zheng HC, Takahashi H, Li XH , et al . Overexpression of GRP78 and GRP94 are markers for aggressiver behavior and poor prognosis in gastric carcinoma[J] . Hum Pathol, 2008, 39(7):1042-1049

  [9] Hodorova I, Rybarova S , Solar P , et al. GP96 and its different expression in breast carcinomas[J]. Neoplasma,2008,55(1):31-35

  [10] Fu Y, Lee AS. Glucose regulated proteins in cancer progression, drug resistance and immunotherapy[J] . Cancer Biol Ther , 2006,5(7):741-744

  [11] Kubata H, Suzuki T , Lu J , et al. Increased expression of GRP94 protein is associated with decreased sensitivity to in cervical cancer cell[J] . Int J Radiat Biol , 2005,81(9):701-709

  [12] Nomura H , Uzawa K , Yamano Y , et al . Network-based analysis of calcium-binding protein genes identifies Grp94 as a target in human oral carcinogenesis[J] . Br J Cancer, 2007,97(6):792-801

  [13] Zhang LY, Zang XC, Wang LD, et al. Increased expression of GRP94 protein is associated with decreased sensitivity to adriamycin in ovarian carcinoma cell lines. Clin Exp Obstet Gynecol[J] , 2008,35(4):257-263

  [14] Langer R, Feith M, Siewert JR, et al. Expression and clinical significance of glucose-regulated proteins GRP78(BiP) and GRP94 (GP96) in human adenocarcinomas of the esophagus[J]. BMC Cancer, 2008,8:70-75

   


  [1]作者单位:中南大学湘雅二医院老年外科,长沙,410011

  作者简介:刘栋才,男,45岁,副教授,主要从事消化道肿瘤的临床及实验研究。

  * 通讯作者:周建平,男,50岁,教授,博士生导师,主要从事消化道肿瘤临床及实验研究。Tel:13974824248 ;E-mail:dongcailiu@yahoo.com.cn

   

   

温馨提示:以上资料仅供参考,具体情况请免费咨询在线专家 立即咨询

    本文延伸阅读
良性胃肿瘤的晚期症状有哪些 
胃肿瘤是癌症中的一种,现今社会上有很多的人都有胃病,这和人们的饮食有关系。胃病不是很严重的时候是很好治疗的,当胃病严重的时候可能会转化成胃癌。胃癌有良恶性之分,...
    热门阅读
    热点排行