腰椎穿刺部位首选第4节和第5节腰椎间的椎间隙，此外还可以选第3节和第4节腰椎间隙，或者第5节腰椎和骶椎之间的椎间隙。腰椎穿刺是临床中经常用到的技术，腰椎总共分为5节，从上到下分别是第1、2、3、4、5节，下面是骶骨，无色透明的是椎间盘，后方是神经，骨头和骨头间是椎板间隙。腰椎穿刺是放入一根针，从椎板间隙一直穿到椎管，将脑脊液抽出并做化验。常用的位置是第4和第5节腰椎之间的椎板间隙，因为此处是马尾结构，不易受到损伤，比较安全。如果在此处穿刺有困难，通常会向上挪一个节段，即在腰3、4椎间隙进行穿刺。如果仍有问题，可再向上一个节段。但人体圆锥有时会位于腰2椎体后方，所以会存在风险。